Фіксація та фіксатори. Формалін як один із популярних фіксуючих засобів.

Співробітники компанії Leica Biosystems – досвідчені науковці, що постійно експериментують, покращують та створюють обладнання та реагенти. Саме тому асортиментний портфель виробника постійно поповнюється доцільними рішеннями, а блог компанії переповнений цікавою та корисною інформацією.

Сьогодні ділимося з вами темою фіксуючих засобів.

Який фіксатор слід обрати?

Більшість відомих лабораторій обирає один чи декілька рутинних фіксаторів, які й використовують протягом тривалого часу для різних типів зразків. Лікар-патолог, гістолог або дослідник повністю звикають інтерпретувати характерну морфологію тканини, отриману за допомогою певного фіксатора та схеми обробки.

Найчастіше стандартним фіксатором буде нейтральний забуферений 10% формалін з іншими агентами, які використовуються для трепанування кісткового мозку (можливо, цинковий формалін), біопсії нирок, заморожених зрізів тощо. Забуферений формалін широко використовується, оскільки він є найбільш гнучким агентом. Його можна включити в процес обробки тканин в закритих машинах. Це дозволяє успішно застосовувати широкий спектр спеціальних фарб. Імуногістохімічні методи, які зазвичай включають етап пошуку антигену, були оптимізовані для фіксованих у формаліні тканин, тому зразки тканини можна зберігати у формаліні протягом тривалого часу без значних шкідливих наслідків. Молекулярні методи, такі як ISH, також підтверджені для використання на фіксованих формаліном тканинах. Саме за цими характеристиками слід оцінювати та обирати ваш новий або замінний фіксатор.

Взагалі у дослідницькому середовищі, де вивчається конкретний елемент тканини, має бути більше контролю над етапом фіксації, і варто перевірити кілька реагентів, перш ніж прийняти остаточне рішення.

Тому, якщо ви плануєте змінити фіксатор, враховуйте наступні властивості на додаток до оцінки результатів, які ви бачите під мікроскопом:

• Горючість.
• Токсичність фіксатора (як короткочасна, так і накопичувальна).
• Нестабільність його компонентів і наявність обладнання для запобігання впливу на персонал.
• Вплив надмірної фіксації на тканини (чи пошкоджує тканини тривала фіксація?).
• Вимоги до зберігання, якщо зразки не можна довго залишати у фіксаторі.
• Сумісність фіксатора з вашим обладнанням для обробки тканин.
• Практичні та законодавчі вимоги до утилізації після використання.

Популярні фіксатори від Leica Biosystems

Частіше за все використовують формалін для гістології: він є відмінним фіксатором для біотканин та забезпечує часткову модифікацію зовнішніх властивостей зразка, практично не торкаючись хімічної будови та молекулярного складу.

Компанія Leica Biosystems і ми, АЛТ Україна, офіційний дистриб’ютор компанії в Україні, пропонуємо вам обрати та купити формалін німецької якості для ваших лабораторних досліджень.

Забуферений формаліновий концентрат

Buffered Formalin Concentrate 5 – це п’ятикратної концентрації партія 10% нейтрального буферного формаліну. Суміш однієї частини концентрату змішується з чотирма частинами води.

Забуферений формаліновий концентрат

Нейтральний забуферений формалін 10%

Готовий 10% буферизований формалін для гістологічного дослідження (забуферений формалін). Зручно упакований у контейнер на 5 літрів.

Нейтральний забуферений формалін 10%

Модифікований забуферений формалін Millonigs

Для гістотехнологів, які віддають перевагу зручності мати під рукою готовий до використання фіксатор, доступний 10% нейтральний забуферений формалін Millonigs.

Модифікований буферний склад Millonigs зберігає зразки тканин та може використовуватися замість традиційного 10% NBF.

Модифікований забуферений формалін Millonigs

Нейтральний забуферений формалін, концентрат

Для приготовлення готового розчину береться одна частина концентрату та добавляється сім частинами води. В результаті чого отримують 10% нейтральний забуферений формалін готовий до використання.

Цей підхід зменшує випаровування формальдегіду та економить час, витрачений на розробку, зважування хімікатів, змішування та очищення.

Нейтральний забуферений формалін, концентрат

Окрім формаліну ми пропонуємо й інші реагенти для гістології від Leica Biosystems. Детально про це в наших нових статтях.

Що таке формалін: де використовують та його небезпека

Формальдегід – це безбарвний газ із сильным запахом, який використовується для виготовлення будівельних матеріалів та багатьох побутових виробів. Використовується в пресованих деревних виробах, таких як ДСП, фанера, ДВП; клеях; тканинах перманентного пресу; покриттях паперових виробів; і певних ізоляційних матеріалах. Він також використовується для виготовлення інших хімічних речовин.

Формальдегід швидко розщеплюється на повітрі – зазвичай протягом кількох годин. Він легко розчиняється у воді, але й там недовго. Але що таке формалін?

Що таке формалін?

При розчиненні у воді формальдегід називають формаліном, який зазвичай використовується як промисловий дезінфікуючий засіб, а також як консервант у похоронних бюро та медичних лабораторіях.

Що таке формалін? (Photo source: study.com)

Формалін також можна використовувати як консервант у деяких продуктах харчування та в продуктах, таких як антисептики, ліки та косметика. Іноді, хоча сам формалін не використовується, є речовини, які виділяють формальдегід. Вони були знайдені в косметиці, милі, шампунях, лосьйонах і сонцезахисних кремах, а також миючих засобах.

Формальдегід можна додавати в їжу як консервант, але він також може вироблятися в результаті приготування їжі та копчення.

Формальдегід (формалін) також зустрічається в природі в навколишньому середовищі. Люди та більшість інших живих організмів виробляють невеликі кількості в рамках нормальних метаболічних процесів.

формальдегід (HCHO) , також званий метаналом, органічна сполука, найпростіша з альдегідів, що використовується у великих кількостях у різноманітних хімічних виробничих процесах. Він виробляється в основному шляхом парофазного окислення метанолу і зазвичай продається як формалін, 37-відсотковий водний розчин.

Як люди піддаються впливу формаліну (формальдегіду)?

Основний спосіб впливу формальдегіду (формаліну) на людей – це його вдихання. Рідка форма може всмоктуватися через шкіру. Люди також можуть зазнати впливу невеликих кількостей, вживаючи їжу або вживаючи рідини, що містять формальдегід (формалін).

Формальдегід зазвичай виробляється в організмі. Ферменти в організмі розщеплюють формальдегід на формиат (мурашину кислоту), який далі розщеплюється на вуглекислий газ. Більшість вдихуваного формальдегіду розщеплюється клітинами, що вистилають ротову порожнину, ніс, горло та дихальні шляхи, так що менше третини всмоктується в кров.

За даними Комісії з безпеки споживчих товарів США, формальдегід зазвичай присутній у низьких рівнях (менше 0,03 частин на мільйон) як у приміщенні, так і на вулиці. Матеріали, що містять формальдегід (формалін), можуть виділяти його у вигляді газу або пари в повітря. Вихлопні гази автомобілів є основним джерелом формальдегіду у зовнішньому повітрі.

Протягом 1970-х років у багатьох будинках використовувалася пінопластова ізоляція сечовиноформальдегідною (UFFI). Але мало будинків зараз утеплені УФФІ. Будинки, в яких UFFI був встановлений багато років тому, ймовірно, зараз не мають високих рівнів формальдегіду.

Вироби з пресованої деревини, що містять формальдегідні смоли, часто є джерелом формальдегіду в побуті. Використання паливних приладів без вентиляції, таких як газові плити, дров’яні печі та гасові обігрівачі, також може підвищити рівень формальдегіду в приміщенні.

Формальдегід також є компонентом тютюнового диму, і як люди, які палять, так і ті, хто дихає пасивним курінням, піддаються впливу більш високого рівня формальдегіду. Одне дослідження виявило набагато вищий рівень формальдегіду, зв’язаного з ДНК, у білих кров’яних клітинах людей, які палять, порівняно з тими, хто не курить.

Що таке формалін в косметиці,

Формальдегід (формалін) та інші хімічні речовини, які виділяють формальдегід, іноді використовуються в низьких концентраціях у косметиці та інших засобах особистої гігієни, таких як лосьйони, шампуні, кондиціонери, гель для душу та деякі лаки для нігтів. Вони можуть підвищити концентрацію формальдегіду в повітрі всередині приміщення на короткий час, але досягнуті рівні набагато нижчі за ті, що вважаються небезпечними.

Професійні кератинові процедури для розгладжування волосся можуть містити формальдегід або хімічні речовини, що виділяють формальдегід. Використання їх може підвищити концентрацію формальдегіду в повітрі до рівня, який може бути потенційною небезпекою.

Працівники галузей, які виробляють формальдегід або продукти, що містять формальдегід, лаборанти, деякі медичні працівники та працівники похоронних бюро можуть піддаватися впливу вищого рівня формальдегіду, ніж загальна громадськість. Вплив відбувається переважно шляхом вдихання газоподібного або пари формальдегіду з повітря або всмоктування через шкіру рідин, що містять формальдегід. В одному великому дослідженні працівників галузей, які виробляють або використовують формальдегід чи формалін, середній рівень впливу формальдегіду становив 0,45 частин на мільйон (ppm), при цьому менше ніж 3% працівників відчували в середньому понад 2 проміле.

Чи може формальдегід (формалін) викликати рак?

Було показано, що вплив формальдегіду викликає рак у лабораторних тварин. Вплив відносно високої кількості формальдегіду в медичних та професійних умовах пов’язують з деякими типами раку у людей, але вплив невеликих кількостей менш зрозумілий.

Що таке формалін: де використовують та його небезпека (Photo source: www.indiamart.com)

Дослідження що таке формалін та його впливу в лабораторії

У щурів інгаляційний формальдегід був пов’язаний з раком носової порожнини та лейкемією. В одному дослідженні щурів, яким давали питну воду, що містить формальдегід чи формалін, спостерігалося збільшення пухлин шлунка, тоді як в іншому не виявлено збільшення будь-яких видів пухлин або раку.

У мишей нанесення 10% розчину формальдегіду на шкіру було пов’язано з швидшим розвитком раку, викликаного іншою хімічною речовиною.

Дослідження на людях

В одному дослідженні вдихання формальдегіду в концентрації 1,9 частин на мільйон (ppm) протягом 40 хвилин не підвищувало рівень формальдегіду в крові.

Кілька епідеміологічних досліджень людей, які зазнали впливу формальдегіду на робочому місці, повідомили про зв’язок між впливом формальдегіду та раком носоглотки (найвищої частини горла), але цей результат не спостерігався в інших дослідженнях. Ці дослідження розглядали працівників у професійних умовах, які використовують або виготовляють формалін і формальдегідні смоли, а також людей, які працюють бальзамувальниками.

Дослідження людей, які зазнали впливу формальдегіду на робочому місці, також виявили можливий зв’язок з раком носових пазух .

Деякі дослідження показали, що бальзамувальники та медичні працівники, які використовують формальдегід, мають підвищений ризик лейкемії, особливо мієлоїдної лейкемії. Деякі дослідження промислових працівників, які піддавалися впливу формальдегіду, також виявили підвищений ризик лейкемії, але не всі дослідження показали підвищений ризик.

Дослідження, які вивчають зв’язок між впливом формальдегіду на робочому місці та іншими видами раку, не виявили послідовного зв’язку.

Одне дослідження показало, що працівники, які піддавалися впливу формальдегіду, мали більший, ніж нормальний, рівень змін хромосом у ранніх лейкоцитах у їхньому кістковому мозку. Цей висновок підтверджує можливий зв’язок між впливом формальдегіду (формаліну) та лейкемією.

Що кажуть експертні агенції

Кілька агенцій (національних та міжнародних) вивчають різні речовини в навколишньому середовищі, щоб визначити, чи можуть вони викликати рак. (Речовина, яка викликає рак або сприяє розвитку раку, називається канцерогеном .) Американське ракове товариство звертається до цих організацій, щоб оцінити ризики на основі даних лабораторних досліджень, досліджень на тваринах і людей.

На основі наявних даних деякі з цих експертних агенцій оцінили канцерогенний потенціал формальдегіду.

Національної токсикологічної програми (NTP) формується з частин кількох різних урядових установ США, в тому числі Національного інституту здоров’я (NIH), Центри з контролю і профілактиці захворювань (CDC), а також по контролю за продуктами і ліками (FDA). NTP перераховує формальдегід як «відомий як канцероген для людини».

Міжнародне агентство з вивчення раку (IARC) є частиною Всесвітньої організації охорони здоров’я (ВООЗ). Його головна мета — виявити причини раку. IARC дійшов висновку, що формальдегід є «канцерогенним для людини» на основі більшого ризику раку носоглотки та лейкемії.

Агентство з охорони навколишнього середовища (EPA) підтримує Комплексну систему інформації про ризики (IRIS), електронну базу даних , яка містить інформацію про вплив на здоров’я людини від впливу різних речовин в навколишнє середовище. EPA класифікує формальдегід як «ймовірний канцероген для людини».

Дослідники Національного інституту раку прийшли до висновку, що на основі даних досліджень на людях і лабораторних досліджень вплив формальдегіду може викликати лейкемію, особливо мієлоїдну, у людей.

що таке формалін та його значення в плані інших проблем зі здоров’ям?

Коли формалін (формальдегід) присутній у повітрі на рівні вище 0,1 частини на мільйон (ppm), деякі люди можуть мати такі наслідки для здоров’я, як:

• сльозяться очі
• відчуття печіння в очах, носі та горлі
• кашель
• хрипи
• нудота
• подразнення шкіри

Деякі люди дуже чутливі до формальдегіду, але інші не реагують на такий же рівень впливу.

Формальдегід у споживчих продуктах, таких як косметика та лосьйони, може викликати алергічну реакцію на шкірі (алергічний контактний дерматит), що може призвести до свербіння, червоного висипу, яка може збільшуватися або утворюватися пухирі.

Як я можу обмежити вплив формаліну, формальдегіду?

У домі

EPA рекомендує використовувати вироби з пресованої деревини “зовнішнього класу”, щоб обмежити вплив формальдегіду в побуті. Ці продукти виділяють менше формальдегіду, оскільки містять фенольні смоли, а не карбамідні смоли. Перед покупкою виробів із пресованої деревини, включаючи будівельні матеріали, шафу та меблі, покупцям слід запитати про вміст формальдегіду в цих продуктах.

Рівень формальдегіду в будинках також можна знизити, не дозволяючи палити всередині та забезпечити належну вентиляцію (наприклад, використовувати вентиляційний вентилятор печі), помірні температури та знижений рівень вологості за допомогою кондиціонерів та осушувачів повітря.

Люди, які стурбовані впливом формальдегіду в засобах особистої гігієни та косметиці, можуть уникати використання продуктів, які містять або виділяють формальдегід. Проте, оскільки кількість формальдегіду, що виділяється з цих продуктів, невелика, неясно, чи це принесе користь для здоров’я.

Формальдегід може бути зазначений на етикетці продукту під іншими назвами, наприклад:

• Формалін
• Мурашиний альдегід
• метандіол
• Метанал
• Метиловий альдегід
• Метиленгліколь
• Метиленоксид

Деякі хімічні речовини, які використовуються як консерванти, можуть виділяти формальдегід, наприклад:

• Бензилгеміформальний
• 2-бром-2-нітропопропан-1,3-діол
• 5-бром-5-нітро-1,3-діоксан
• Діазолідиніл сечовина
• 1,3-диметилол-5,5-диметилгідантоїн (або DMDM ​​гідантоїн)
• Імідазолідиніл
• Гідроксиметилгліцинат натрію
• Кватерніум-15

На робочому місці

Управління з охорони праці та гігієни США (OSHA) встановило обмеження на кількість формальдегіду, якому працівники можуть піддаватися впливу на робочому місці. Наразі ліміт становить 0,75 проміле в середньому протягом 8-годинного робочого дня. Найвища концентрація, якій може піддаватися працівник, становить 2 ppm, і це може відбуватися лише протягом 15 хвилин. Роботодавці повинні контролювати рівень формальдегіду та забезпечувати респіраторами та захисним одягом, якщо це необхідно для обмеження впливу. Сюди входять працівники на будь-якому робочому місці, де є ймовірність впливу формальдегіду, включаючи перукарні, які використовують комерційні продукти для розгладжування волосся, які виділяють формальдегід.